金颖莉，夏宣平，曹曙光，林道泼，胡定元，夏盛隆，蒋益
（温州医院医院消化内科，浙江温州）
摘?要
目的：采用葡聚糖硫酸钠（DSS）构建实验性结肠炎小鼠模型，探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）的受体基因敲除（TRAIL-R-/-）对结肠炎症及Th17细胞凋亡的影响。
方法：将C57BL/6品系小鼠分为4组：TRAIL-R-/-结肠炎组、TRAIL-R-/-对照组、野生型（WT）结肠炎组、WT对照组，每组各9只。结肠炎组饮用3.5%的DSS，对照组饮用清水。7d后，从临床表现和组织病理学上评估小鼠结肠炎的严重程度。取外周血单个核细胞（PBMCs）和结肠黏膜固有层单个核细胞（LPMCs），采用流式细胞术检测Th17细胞占CD4+T细胞的比例，采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）、Westernblot和酶联免疫吸附测定（ELISA）检测视黄酸相关孤儿受体（ROR-γt）和IL-17A的mRNA和蛋白表达水平。采用TUNEL荧光染色技术及激光共聚焦显微镜观察结肠组织中Th17细胞的凋亡率。通过比色法检测结肠组织中凋亡蛋白酶Caspase3、Caspase8和Caspase9的活性。
结果：DSS诱导后，TRAIL-R-/-小鼠较WT小鼠发生了更为严重的结肠炎。TRAIL-R-/-结肠炎小鼠PBMCs中Th17细胞的比例（P＜0.01），以及ROR-γt和IL-17A的mRNA和蛋白表达水平均显著高于WT结肠炎小鼠（均P＜0.05）。TRAIL-R-/-结肠炎小鼠LPMCs中Th17细胞的比例（P＜0.01），以及ROR-γt和IL-17A的mRNA和蛋白表达水平均显著高于WT结肠炎小鼠（均P＜0.05）。与WT结肠炎小鼠相比，TRAIL-R-/-结肠炎小鼠的结肠组织中Th17细胞的凋亡率（P＜0.01）以及Caspase3和Caspase8的酶活性均显著降低（均P＜0.01）。
结论：DSS诱导后，TRAIL-R-/-小鼠的结肠炎症较WT小鼠更为严重，原因可能是Th17细胞凋亡减少，其数目和活性增高所致。
[关键词]受体，TNF相关凋亡诱导配体；结肠炎；Th17细胞；细胞凋亡
本文引用：金颖莉,夏宣平,曹曙光,等.葡聚糖硫酸钠诱导的结肠炎小鼠中TRAIL-R基因敲除对Th17细胞凋亡的影响[J].温州医科大学学报,,50(12):-.
温州医科大学学报
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